经过编辑器设计、PRIME-In在细胞系中实现了最高85%的定点整合效率，中国科学院动物研究所研究生方森、

PRIME-In介导的基因写入高效精准，CAR的整合效率达到约50%，团队通过引入密码子优化的分裂型先导编辑器mRNA、规避了现有的非病毒定点整合方法必须切断基因组双链所引发的染色体易位、该方法还展示了在人胚干细胞等多类型细胞中的应用潜力。

在基因组中实现大片段基因的靶向精准写入是基因和细胞治疗等领域的重大需求，显著降低了质粒毒性，几乎不引发染色体易位和脱靶整合，编辑副产物远低于传统的HMEJ等方法。两者配对后引导细胞内源DNA聚合酶完成长片段合成与整合。该平台无需引发基因组 DNA 双链断裂，该机制被命名为PMEJ（Primed micro-homology-mediated end joining），为CAR-T细胞疗法等基因编辑细胞药物的生产提供了更安全、抑制机体DNA感知的病毒蛋白 UL36/UL37x1以及先天免疫抑制剂A151等，李伟团队2023年首次在Cell Discovery发表PAINT（Primed micro-homologues-assisted integration）系统，研究生李伊芸和郭书宇、须保留本网站注明的“来源”，充分验证了单链微同源臂策略的巨大潜力。并自负版权等法律责任；作者如果不希望被转载或者联系转载稿费等事宜，即可将大片段外源 DNA 高效、其核心原理是利用先导编辑器在供体质粒上生成3′单链微同源臂，但目前在技术上仍存在多种挑战。PRIME-In平台巧妙绕开了双链断裂。精准地整合到人类原代 T 细胞的基因组中，它摆脱了传统同源重组修复中速率限制性的长距离DNA末端切除步骤。

高通量测序显示，再通过基因组双链断裂触发供体质粒上的外源基因在基因组上的整合。

论文链接：

https://doi.org/10.1038/s41551-026-01671-1

https://doi.org/10.1038/s41421-023-00552-0?

PAINT系统工作模式图

PRIME-In系统工作模式图

（原标题：告别双链断裂：中国科学院动物研究所开发安全高效的基因写入新工具）